光還元法によるシトクロムcの折り畳み

＜折り畳み反応＞
NADHを用いてシトクロムCを光還元し、折り畳み反応を起こさせる。

＜実験の目的＞
タンパク質の折り畳みは、イメージとしてはまとまりのないバラバラな構造から、折り畳んだコンパクトな構造になる過程と想像できるので、そこに何らかの体積変化が見えるはずであり、それをTGを使って捉える。

＜反応スキーム＞
NADHの反応
NADH と355nmの光(二光子) →NAD H＋＋ e－
NAD H＋ →NAD・＋ H＋
NAD・＋ NAD・ → (NAD)２
NADHの光還元によって発生した電子はシトクロムcのヘムを還元し、（FeⅢ → FeⅡ）グアニジン濃度が3.5Mの条件で折り畳みを開始させる。＜＝CDによって確認

＜測定＞
ポンプ 355nm、プローブ 840nm。
バッファー 100mM Phosphate（グアニジンを入れた後で、ｐHを７に合わせる）
5分間以上の窒素脱気、1時間以内の測定
パワーは１００μJ付近。
サンプル濃度、NADH 300uM、CytC 100uM
＜信号＞
解析中です。
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